2025年，一場(chǎng)關(guān)于“體內編程”的細胞治療革命，正在醞釀。

       過(guò)去十年，CAR-T療法改寫(xiě)了血液腫瘤治療史，但其百萬(wàn)高價(jià)、漫長(cháng)制備周期和復雜供應鏈，始終是懸在商業(yè)化頭頂的達摩克利斯之劍。

       如今，一股新勢力正試圖改變這些難題——體內CAR-T（in vivo CAR-T），通過(guò)基因遞送技術(shù)直接在患者體內“改造”T細胞，無(wú)需體外分離、擴增和回輸，將治療流程從數周壓縮至數天，成本也有望大幅下降。

       今年3月，阿斯利康豪擲70億元收購體內細胞療法公司EsoBiotec，徹底點(diǎn)燃行業(yè)熱情。Capstan、Umoja、Interius等海外biotech競相推進(jìn)管線(xiàn)，云頂新耀、科濟藥業(yè)等國內玩家亦加速布局。據不完全統計，全球已有超20個(gè)體內CAR-T項目處于臨床前或臨床早期，靶向CD19、BCMA，且不止血液瘤，還向實(shí)體瘤、自免疫病延伸。

       盡管這一前沿技術(shù)的前路注定還有諸多坎坷與挑戰，如何精準遞送CAR基因？如何避免脫靶風(fēng)險……但是，這代表著(zhù)腫瘤治療發(fā)展的重要方向，甚至不僅僅是技術(shù)優(yōu)化，而是對整個(gè)治療模式的顛覆。

       1. 更快、更好、更便宜

       體內CAR-T之所以被視為一種顛覆性前沿技術(shù)，是因為其有能力通過(guò)技術(shù)創(chuàng )新，從根本上解決現有CAR-T療法的痛點(diǎn)。

       目前，全球范圍內及中國已上市12款CAR-T療法，無(wú)一例外均是ex vivo CAR-T，也就是需要將自體T細胞在體外經(jīng)過(guò)基因工程改造和擴增培養后，再回輸到患者體內的細胞療法。

       雖然傳統CAR-T療法早已在腫瘤治療效果上取得了顛覆性突破，但其整體生產(chǎn)過(guò)程復雜、周期漫長(cháng)且成本昂貴，一定程度限制了其商業(yè)化進(jìn)程和患者的可及性。

       對比之下，體內CAR-T跳過(guò)了體外基因改造和擴增步驟，直接在患者體內生成和激活CAR-T細胞，無(wú)論是在生產(chǎn)周期、安全性還是可及性方面，都有優(yōu)勢，更快、更好、更便宜。

       具體來(lái)說(shuō)，體內CAR-T療法省去了體外細胞培養和基因改造的復雜步驟，通過(guò)病毒載體、納米載體等遞送系統，把CAR基因直接遞送到患者體內的T細胞中，實(shí)現在體內進(jìn)行基因改造。相比傳統CAR-T的個(gè)性化、私人訂制特性，類(lèi)似現貨型的體內CAR-T療法，大大簡(jiǎn)化了生產(chǎn)及治療流程。

       體內CAR-T療法不僅流程簡(jiǎn)化，療效也有望更好，副作用更少。因為它是在患者體內直接進(jìn)行基因改造，能更好地模擬體內的生理環(huán)境，讓改造后的T細胞能更好地適應并攻擊腫瘤細胞。

       同時(shí)，體內CAR-T避免了體外生產(chǎn)過(guò)程中可能出現的細胞污染和變異風(fēng)險，患者也不需要接受化療方案進(jìn)行清淋，保持完整的免疫系統。

       高昂的治療費用一直是限制CAR-T療法廣泛應用的“攔路虎”。傳統的CAR-T療法需要高度專(zhuān)業(yè)化的技術(shù)和設備，制備過(guò)程復雜又耗時(shí)，導致治療費用居高不下。而體內CAR-T療法通過(guò)簡(jiǎn)化治療流程和優(yōu)化制備工藝，有望顯著(zhù)降低治療成本。

       巨大的技術(shù)發(fā)展潛力，吸引著(zhù)越來(lái)越多的科學(xué)家和企業(yè)投身于體內CAR-T的研究和開(kāi)發(fā)。據不完全統計，全球有超過(guò)20款管線(xiàn)處于臨床前或臨床早期，Interius、Umoja、EsoBiotec處于第一梯隊，國內也已有多家公司布局體內CAR-T，包括濟因生物、遠泰生物、先博生物、博生吉、云頂新耀等。

       跨國大藥企也在布局體內CAR-T療法，此前賽諾菲曾披露公司有三個(gè)體內CAR-T項目處于臨床前開(kāi)發(fā)階段，2024年1月宣布與Umoja就開(kāi)發(fā)體內CAR-T療法達成潛在總額14.4億美元的合作，安斯泰來(lái)在2月宣布與Kelonia達成合作以開(kāi)發(fā)體內CAR-T。

       顯然，2024年是體內CAR療法大跨越的一年。進(jìn)入2025年，向來(lái)看重CAR-T的阿斯利康又添了一把火。

       2. 技術(shù)的軍備競賽

       由于體內遞送CAR需要滿(mǎn)足一定的標準，包括精確的T細胞靶向、高效的基因編輯和低毒性。因此，體內CAR-T的爆發(fā)，本質(zhì)是一場(chǎng)遞送技術(shù)的軍備競賽。目前的技術(shù)路線(xiàn)主要分為兩類(lèi)，病毒載體和納米載體。

       前者是利用經(jīng)過(guò)改造的、能夠特異性感染T細胞的慢病毒載體遞送CAR基因；后者則是利用脂質(zhì)納米顆粒（LNP）LNP包裹mRNA或DNA，并通過(guò)特定配體靶向遞送至T細胞。

       其中，慢病毒載體在已獲批的傳統CAR-T療法中積累了較多CMC以及臨床經(jīng)驗，也成為當前體內CAR-T開(kāi)發(fā)的熱門(mén)選擇，進(jìn)度最快。

       Interius、Umoja、EsoBiotec等全球第一梯隊選手，均為慢病毒玩家。

       2024年1月，Umoja宣布與艾伯維達成兩項獨家選擇權和許可協(xié)議，交易總額超14億美元。其中之一是為艾伯維提供了獨家選擇權，以許可Umoja的靶向CD19的體內CAR-T候選藥物UB-VV111；其二是艾伯維提供多達四種額外CAR-T候選藥物的選擇權。半年后，Umoja宣布FDA已批準UB-VV111的IND，用于治療血液惡性腫瘤。

       2024年6月11日，發(fā)表在Blood 雜志上的研究顯示，在未進(jìn)行化療清淋的情況下，將VivoVec顆粒（VivoVec particles, VVP）注射到非人類(lèi)靈長(cháng)類(lèi)動(dòng)物體內后，導致了CD20 CAR-T細胞的大量產(chǎn)生，B細胞完全耗盡持續時(shí)間超過(guò)10周。這些數據支持VivoVec平臺的進(jìn)一步臨床開(kāi)發(fā)。

       VivoVec與RACR/CAR是Umoja有兩大技術(shù)平臺。前者是一種生成VivoCAR T細胞的體內工程平臺，使用一種獨特的慢病毒載體包膜來(lái)促進(jìn)T細胞的體內轉導。VivoCAR T細胞是通過(guò)淋巴系統在體內生成的抗癌細胞，通過(guò)RACR/CAR系統進(jìn)行基因重組。

       其技術(shù)平臺已經(jīng)進(jìn)行了臨床前的驗證。結果顯示T細胞共刺激分子可以增強VivoVec粒子與T細胞結合、活化與轉導，促使生成更多CAR-T細胞并增強體內抗腫瘤活性，MDF設計還可以可大幅降低給藥劑量，提高安全性。

       近期，在CAR-T領(lǐng)域勢頭正盛的傳奇生物，也在最新的財報電話(huà)會(huì )議中透露其體內CAR-T的布局，同樣為慢病毒路線(xiàn)。

       根據公司介紹，這是一個(gè)已布局兩年的平臺，使用分子工程納米病毒，可以特異性識別患者體內的免疫細胞（T細胞）；同時(shí)也設計病毒以減少對正常組織的通用或非特異性轉導，預計今年6月和7月會(huì )有第一例患者服用，并在今年年底獲得初步臨床結果。

       慢病毒載體之外，基于LNP載體的體內CAR-T也在加速發(fā)展。

       相比之下，理論上納米載體的遞送安全性更優(yōu)。這主要是因為其CAR表達具有瞬時(shí)性且通常不轉導至目的細胞基因組中。

       早在2017年，就有研究團隊報告了基于納米顆粒載體可以驅動(dòng)小鼠B細胞耗竭，而后基于mRNA新冠疫苗的成功，極大提高了LNP系統的知名度，包括Capstan、Orbital在內的biotech公司也抓住了體內CAR-T的機會(huì )。

       Ensoma開(kāi)發(fā)了一種病毒樣顆粒Engenious?平臺，可以遞送高達35千堿基對的包裝DNA基因材料，是AAV載體上限的七倍以上。Capstan利用mRNA-LNP平臺，在心臟病小鼠模型中成功制造了體內CD5特異性CAR T細胞。

       Capstan使用靶向CD5離子化脂質(zhì)納米粒子（CD5/LNP）包裹針對成纖維細胞激活蛋白的CAR mRNA分子,在LNP注射后48小時(shí)，一個(gè)新的CAR-T細胞亞群出現了，占總T細胞群的20%。

       去年3月，Capstan完成了1.75億美元的B輪融資，投資者陣容豪華，包括強生、BMS、禮來(lái)、拜耳、諾華、輝瑞等大藥企。顯然，業(yè)內對其技術(shù)寄予厚望。

       Capstan表示，裝載mRNA的LNP的一大優(yōu)勢是其可調性。這類(lèi)療法只是讓T細胞暫時(shí)表達B細胞殺傷CAR，因此，劑量調整和重復用藥可以最大限度地提高療效同時(shí)最小化長(cháng)期安全問(wèn)題。此外，LNP比慢病毒載體更容易生產(chǎn)制造，在成本和復雜性方面，相比整個(gè)病毒，生產(chǎn)LNP和mRNA要容易得多。

       當然，一切還有待臨床的驗證。

       3. 在挑戰中前進(jìn)

       盡管技術(shù)前景可期，過(guò)去兩年，體內CAR-T研發(fā)也取得了一些實(shí)質(zhì)性進(jìn)展，然而，作為一種前沿技術(shù)，體內CAR-T仍面臨諸多挑戰。

       比如，如何確保足夠數量的目標細胞被成功改造？如何避免脫靶效應？體內直接進(jìn)行基因編輯/表達，長(cháng)期安全性、免疫原性、潛在的基因毒性等，也都需要嚴密監控和評估。

       作為一種新型體內基因療法，其在臨床中的療效及安全性問(wèn)題，備受重視。

       正如前文所說(shuō)，體內CAR-T療法的一個(gè)主要問(wèn)題是如何有效地將CAR轉基因遞送到體內的目標T細胞中。病毒載體可以促進(jìn)細胞攝取和核穿透，然而，直接向患者注入攜帶CAR構建物的病毒載體，其靶向能力有限；這種方法也帶來(lái)了脫靶風(fēng)險，其他細胞類(lèi)型可能被轉染。

       脫靶風(fēng)險，也是監管機構重點(diǎn)關(guān)注的。

       納米載體平臺相比病毒載體，相關(guān)的風(fēng)險和生產(chǎn)成本較低，似乎更適合于體內靶向T細胞，但還需要額外的研究來(lái)提高這些納米粒子在生物環(huán)境中的穩定性和生物相容性，以防止它們在到達并靶向T細胞之前，在體內被降解和產(chǎn)生潛在的不良反應。

       當然，其載體制備的工藝復雜性更高；有限的轉染效率，如基于mRNA的瞬時(shí)CAR-T，療效的持久性仍需要驗證。

       與此同時(shí)，體內CAR-T的免疫原性也需要考慮，由于體內CAR-T療法無(wú)需且不能清淋，因此保留了患者功能齊全的免疫系統，但這也可能導致對載體的“排斥”。

       與傳統CAR-T相比，體內CAR-T的臨床試驗設計更復雜，不僅需要遞送技術(shù)更進(jìn)一步提升，監管政策尚需進(jìn)一步完善，來(lái)實(shí)現創(chuàng )新與風(fēng)險控制的平衡。

       當然，無(wú)論如何，隨著(zhù)技術(shù)的發(fā)展，一場(chǎng)細胞治療領(lǐng)域的深刻變革正在悄悄醞釀。

       這代表著(zhù)細胞治療發(fā)展的一大重要方向，并且，體內CAR-T不僅有望改進(jìn)現有腫瘤適應癥的治療，還有潛力開(kāi)拓更多戰場(chǎng)，實(shí)體瘤、自免。有研究顯示，體外CAR-T通過(guò)殺死B細胞可以誘導免疫重置并可能治愈狼瘡。

       Interius優(yōu)先推進(jìn)一款CD19靶向體內CAR–T在2025年開(kāi)展治療自免疾病的臨床研究；Umoja及其合作伙伴馴鹿生物計劃在中國的自身免疫性疾病患者中開(kāi)始測試一種靶向CD22的候選體內CAR-T；Umoja也計劃探索UB-VV200與UB-TT170聯(lián)用，應用于卵巢癌、宮頸癌、子宮內膜癌、三陰性乳腺癌和非小細胞肺癌等多種病癥。

       盡管技術(shù)仍在早期驗證階段，后續挑戰重重，但近兩年的爆發(fā)已經(jīng)表明，這場(chǎng)變革不再停留于紙面。