溶瘤病毒（oncolytic virus，OVs）是一種新型腫瘤免疫療法，其通過(guò)不同的調控機制在腫瘤細胞內復制、裂解腫瘤細胞，而不影響正常細胞生長(cháng)。目前，溶瘤病毒主要有腺病毒（adenovirus，AD）、痘病毒、皰疹病毒、呼腸孤病毒和柯薩奇病毒等，給藥方法有瘤內注射，靜脈輸送，胸腹腔、膀胱內注射和細胞載體四種。

       溶瘤病毒抗腫瘤機制

       溶瘤病毒選擇性感染腫瘤細胞，在腫瘤細胞內進(jìn)行自我復制來(lái)破壞腫瘤細胞，通過(guò)釋放病原體相關(guān)分子(pathogen-associated molecular pattern molecules，PAMP)、腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associated antigen，TAA) 、炎性因子、趨化因子等物質(zhì)，激活機體免疫系統，直接或間接殺傷腫瘤細胞，將冷腫瘤轉變?yōu)闊崮[瘤。①直接感染裂解腫瘤細胞而不感染正常細胞。病毒在進(jìn)入腫瘤細胞后，大量復制造成腫瘤細胞的裂解，直接殺傷腫瘤細胞，同時(shí)在腫瘤組織內產(chǎn)生空間，增加免疫細胞的浸潤和增殖。②釋放腫瘤抗原，刺激機體免疫應答。腫瘤細胞裂解后釋放危險相關(guān)分子( danger-associated molecular pattern molecules，DAMPs)、PAMP和TAA 募集抗原提呈細胞( antigen presenting cell，APC)，APC 將TAA呈遞給殺傷性T細胞，產(chǎn)生免疫應答。同時(shí)激活 NF-κB 信號通路，誘導腫瘤壞死因子-α ( tumor necrosis factor-α，TNF-α) 和白細胞介素-6 ( interleukin-6，IL-6) 因子表達，產(chǎn)生炎性微環(huán)境，促進(jìn)免疫細胞成熟和激活，增強抗腫瘤作用。③調節腫瘤微環(huán)境，逆轉免疫抑制微環(huán)境。溶瘤病毒感染腫瘤細胞，可活化樹(shù)突狀細胞 (dendritic cells，DC) 細胞表面的模式識別受體(pattern recognition receptor，PRR)，逆轉免疫抑制狀態(tài)的DC 細胞，促進(jìn)DC 細胞對腫瘤細胞的識別，上調 CXCL1 和CXCL5 等趨化因子的表達，誘導中性粒細胞浸潤，逆轉腫瘤部位免疫抑制微環(huán)境，增強抗腫瘤效應。④轉基因改造促使免疫調節因子表達并增加腫瘤部位免疫細胞的浸潤和增殖。基因改造后的溶瘤病毒在進(jìn)入腫瘤細胞后，進(jìn)一步表達炎性因子或對免疫細胞直接作用，激活機體免疫系統，殺傷殘留的腫瘤細胞。⑤轉基因改造促使趨化因子表達并增加免疫細胞歸巢和浸潤。基因改造后的溶瘤病毒在進(jìn)入腫瘤細胞后，進(jìn)一步表達趨化因子等，使腫瘤部位免疫細胞歸巢，增強抗腫瘤作用。⑥破壞腫瘤相關(guān)血管。腫瘤的生長(cháng)依賴(lài)腫瘤血管提供營(yíng)養物質(zhì)，因此，破壞腫瘤相關(guān)血管能夠有效地抑制腫瘤的生長(cháng)。研究表明，水泡性口炎病毒(VSV) 可以在體內直接感染并破壞腫瘤血管，而對正常血管沒(méi)有影響。水泡性口炎病毒在腫瘤組織中擴散并進(jìn)行復制，啟動(dòng)機體內由嗜中性粒細胞介導的炎癥反應，從而導致腫瘤血管內微血栓的形成。腫瘤血管內的微血栓影響血管向腫瘤組織提供營(yíng)養物質(zhì)，最終導致腫瘤細胞缺少營(yíng)養死亡。

       溶瘤病毒聯(lián)合治療現狀

       溶瘤病毒是一種多功能抗癌藥，選擇性感染、復制并殺死腫瘤細胞。溶瘤病毒在多個(gè)臨床試驗中顯示出不同的治療效果，但很少長(cháng)期誘導體內腫瘤的完全消退。而且，異質(zhì)性腫瘤的選擇性壓力導致對溶瘤病毒的抗性。為了克服這些不足，臨床上建立起許多新穎溶瘤病毒聯(lián)合療法，增強對腫瘤的殺傷力。

       1、溶瘤病毒聯(lián)合化療或靶向治療

       化療是直接殺死惡性細胞，增強腫瘤細胞免疫原性，增強溶瘤病毒的細胞毒 性，溶瘤病毒聯(lián)合化療具有協(xié)同作用，促進(jìn)抗腫瘤免疫反應。溶瘤病毒聯(lián)合化療的機制包括：①逃避抗病毒免疫反應，增強病毒溶瘤作用，改善 HSV、AD、麻疹病毒和呼腸孤病毒抗腫瘤功效；②抵抗免疫，抑制腫瘤微環(huán)境。腫瘤微環(huán)境主要組成部分是調節性T 細胞（regulatory cells，Treg）和骨髓來(lái)源抑制性細胞（my eloid-derived suppressor cells，MDSC），二者能有效降低腫瘤免疫性。研究表明，腫瘤微環(huán)境內的MDSC積累會(huì )抑制抗腫瘤效應 T 細胞，促進(jìn)腫瘤生長(cháng)，吉西他濱、舒尼替尼、5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu）等許多化學(xué)藥物能清除MDSC，提高生存率。③調節腫瘤細胞免疫原性。阿霉素和 Ara-C能降低免疫檢查點(diǎn)分子的表達，阻斷其對浸潤 T 細胞的抑制?；熕幬镉绊懚鄠€(gè)生物過(guò)程，如雷帕霉素及其類(lèi)似物改變 mTOR 信號傳導，增加溶瘤病毒靶向性，誘導自噬。溶瘤病毒聯(lián)合化療或單藥治療腫瘤均優(yōu)于化療。

       與聯(lián)合化療原理相同，靶向治療能抑制癌細胞內異常的信號通路。聯(lián)合使用BRAF、MRK 激酶抑制劑和 3 型呼腸孤病毒 [reovirus type 3（Dearing），RT3D]，通過(guò)細胞凋亡體外殺死細胞。RT3D 聯(lián)合細胞毒 性藥物研究表明，RT3D 安全、可耐受，將RT3D 與常規抗癌藥物聯(lián)合使用，可實(shí)現協(xié)同作用。

       2、溶瘤病毒聯(lián)合放療

       溶瘤病毒和放療是腫瘤治療的兩個(gè)不同領(lǐng)域，為不重疊的細胞毒 性譜。輻射能增強病毒的溶瘤作用，病毒能夠提高細胞放療敏感性，二者具有協(xié)同作用。溶瘤病毒是一種極具潛力的腫瘤治療策略。最初認為溶瘤病毒的細胞毒 性是增加病毒復制、增強腫瘤細胞感染和溶瘤作用，但目前大多認為溶瘤病毒阻止DNA 修復，使腫瘤細胞對輻射敏感，誘導細胞凋亡。溶瘤病毒與放療聯(lián)合抗腫瘤，療效顯著(zhù)。高度減毒的牛痘病毒（VV，GL-ONC1）結合放療，可提高抗腫瘤療效；高劑量放療增強腺病毒在前列腺癌細胞內的復制，抑制癌細胞的增殖。與單獨治療相比，HSV-1 聯(lián)合放療對疾病預后有明顯改善作用，NVl066 聯(lián)合放療能顯著(zhù)縮小非小細胞肺癌和惡性間皮瘤的腫瘤體積。

       3、溶瘤病毒聯(lián)合免疫治療

       溶瘤病毒雖然能夠快速減少局部腫塊大小，但不易產(chǎn)生持續性抗腫瘤免疫應答。免疫應答是溶瘤病毒療法的關(guān)鍵組成部分，初始誘導很強，隨后效應細胞的抗腫瘤活性被多種免疫調節劑（如 CTLA-4 和 PD-L1）抑制。在惡性黑色素瘤小鼠模型中，溶瘤麻疹病毒能夠將抗CTLA-4 和抗 PD-L1 抗體靶向遞送至腫瘤微環(huán)境，誘導較強的特異性抗腫瘤免疫反應，未發(fā)現免疫相關(guān)毒 性。另一種黑色素瘤小鼠模型中，瘤內注射 NDV 聯(lián)合抗CTLA-4 抗體能使腫瘤消退，存活時(shí)間延長(cháng)。PDL1 產(chǎn)生于腫瘤細胞和浸潤腫瘤細胞的過(guò)表達，與 T細胞上的 PD-1 結合，誘導 T 細胞凋亡，使腫瘤細胞逃逸。溶瘤病毒感染會(huì )增強免疫調節劑的表達，增強腫瘤細胞對 PD-1 或 PDL1 阻斷的敏感性，引起抗腫瘤免疫反應。因此，溶瘤病毒聯(lián)合免疫具有治療價(jià)值。聯(lián)合療法增加腫瘤內 CD8+ T 細胞浸潤，可能吸引腫瘤特異性 T 細胞，逆轉對 PD-1 阻斷療法的耐藥性。溶瘤病毒瘤內給藥后CD4+和 CD8+ T 細胞全身性增加，CD8+ T 細胞表達PD-1、增加對腫瘤的浸潤，而腫瘤細胞表達 PD-L1，可能限制了溶瘤病毒單藥的抗腫瘤活性，臨床活性?xún)?yōu)于單獨使用任何一種療法的預期。

       第一代溶瘤病毒僅具有腫瘤特異性，如H101、Reolysin 和 Telomelysin；第二代溶瘤病毒具有腫瘤特異性，含有1個(gè)功能性外源基因的表達，如T-VEC、JX-594和H102；第三代溶瘤病毒具有腫瘤特異性、免疫調節與免疫治療功能，多于 1 個(gè)功能性外源基因的表達，外源基因功能相互協(xié)調，如 GO701 和 GV802。近年來(lái)，隨著(zhù)醫療水平的提升及技術(shù)的成熟，溶瘤病毒越來(lái)越頻繁地應用于抗腫瘤治療，為廣大惡性腫瘤患者帶來(lái)希望?？鼓[瘤療法中，目前最常用的兩種溶瘤病毒是重組人 5 型腺病毒（安柯瑞，H101）與 T-VEC（talimogene laherparepvec）。H101 是一種經(jīng)基因改造的溶瘤腺病毒，于2005年被國家食品藥品監督管理總局（CFDA）批準用于聯(lián)合化療治療鼻咽癌，是世界上最早的一款溶瘤病毒。T-VEC 是第二代單純皰疹病毒Ⅰ型，于2015 年被美國食品藥品監督管理局（FDA）批準用于治療不能手術(shù)的黑色素瘤，隨后于2016 年在歐洲獲得批準。

       參考資料

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       [2]李平翠,楊帆,歐霞,張繼虹,魏大巧。溶瘤病毒載體研究進(jìn)展[J]。生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,2021,48(03):237-245。DOI:10。16476/j。pibb。2020。0146。

       [3]王磊,霍彬,霍小東,王海濤。溶瘤病毒抗腫瘤治療的臨床應用進(jìn)展[J]。中國腫瘤臨床,2021,48(11):581-586。

       作者簡(jiǎn)介：小泥沙，食品科技工作者，食品科學(xué)碩士，現就職于國內某大型藥物研發(fā)公司，從事?tīng)I養食品的開(kāi)發(fā)與研究。