BTK是一個(gè)常見(jiàn)的腫瘤靶點(diǎn)，全球已有6款BTK抑制劑獲批上市，但是抑制劑用久了可能會(huì )引起耐藥性等問(wèn)題。

       PROTAC是近幾年研究非?；馃岬囊婚T(mén)學(xué)科，它可以降解整個(gè)蛋白而不僅僅是抑制蛋白酶活性，可以避免耐藥性等問(wèn)題，因此很多藥企在布局BTK PROTACs藥物的開(kāi)發(fā)。

       BTK的PROTACs藥物開(kāi)發(fā)多在早期，如百濟神州的BGB-16673、海思科的HSK29116以及Nurix Therapeutics的NX-2127和NX-5948等。

       百濟神州公布了其BTK的PROTAC化合物BGB-16673的結構與臨床活性，初步臨床數據顯示積極的結果。

       近期，Science上一篇文獻報道了BTK耐藥突變的功能分析，以及BTK降解劑NX-2127的臨床I期積極試驗結果。

       BTK的PROTACs正在緩緩前進(jìn)……

       01

       BTK的抑制劑和

       PROTACs的優(yōu)點(diǎn)

       布魯頓酪氨酸激酶（Bruton’s tyrosine kinase，BTK）是B細胞受體信號通路中的一種非受體激酶，在B細胞發(fā)育和分化中起著(zhù)至關(guān)重要的作用，BTK對惡性B細胞存活至關(guān)重要?？诜﨎TK抑制劑是B細胞惡性腫瘤患者的標準治療方法，可防止B細胞增殖并誘導細胞凋亡。

       目前，全球有6款BTK抑制劑獲批上市，包括第一代共價(jià)抑制劑伊布替尼，第二代共價(jià)抑制劑阿卡替尼、澤布替尼、tirabrutinib和奧布替尼，以及第三代非共價(jià)抑制劑pirtobrutinib，其中伊布替尼、阿卡替尼、澤布替尼和奧布替尼4款在國內獲批上市。相關(guān)文章拓展：35599元/盒，阿可替尼開(kāi)售！淺談三代BTK抑制劑的前世今生。

       BTK抑制劑在治療B細胞惡性腫瘤方面已經(jīng)取得了一定的成功，共價(jià)BTK抑制劑與BTK殘基C481共價(jià)結合，不可逆地抑制下游激酶的磷酸化并阻斷B細胞活化。由于這些藥物通常是連續給藥的，因此容易導致BTK蛋白突變而引起耐藥性和不可接受的毒性。

       不同的BTK突變蛋白可分為兩類(lèi)，T474I和C481S保留了蛋白的激酶活性，而如C481F和L528W等突變則影響了蛋白激酶活性（圖1）[1]。

       圖1. BTK突變類(lèi)型

       蛋白水解靶向嵌合體（PROTACs）是由靶蛋白的配體、E3泛素連接酶配體和連接鏈三部分組成，它可以招募E3泛素連接酶靠近靶標蛋白，使靶蛋白泛素化，進(jìn)一步被蛋白酶體降解。

       相對小分子抑制劑來(lái)說(shuō)，PROTACs有以下優(yōu)點(diǎn)：

       1. 擴展了可成藥靶標，可以靶向那些沒(méi)有小分子抑制劑或小分子抑制劑療效不佳的靶標蛋白；

       2. 催化效率高，可以使用催化量起作用，避免了像小分子長(cháng)時(shí)間占有才能發(fā)揮藥效的情況；

       3. 克服耐藥性，PROTACs不僅抑制蛋白活性，還可以降解整個(gè)蛋白從而破壞蛋白質(zhì)的酶和非酶功能（例如支架）或轉錄功能，克服傳統小分子的耐藥性。

       02

       部分臨床在研的

       BTK的PROTACs

       基于以上優(yōu)點(diǎn)，為了克服BTK抑制劑的耐藥性問(wèn)題，很多藥企從事BTK的PROTACs藥物開(kāi)發(fā)（表1），BTK的PROTACs可以促進(jìn)BTK蛋白的降解，繞過(guò)多重耐藥機制，增強藥物的療效，使傳統的BTK抑制劑更加靈活、高效地抑制B細胞的生長(cháng)，從而提高治療的持續時(shí)間和有效性。這一策略對于改善B細胞惡性腫瘤患者的預后和生存率具有潛在的重要意義。

       表1. 部分臨床在研的BTK的PROTACs

       代表性藥物

       01

       BGB-16673

       BGB-16673是百濟神州基于其PROTAC（CDAC）技術(shù)平臺開(kāi)發(fā)的一款靶向BTK的蛋白降解劑（圖2）[2]。

       圖2. BGB-16673的作用機制

       百濟神州也公布了BGB-16673的結構，可以看出BGB-16673是由BTK抑制劑通過(guò)連接鏈連接CRBN配體而得（圖3）[3]。

       圖3. BGB-16673化學(xué)結構

       BGB-16673在BTK野生型和表達C481S突變淋巴瘤異種移植模型的長(cháng)期治療中，比BTK抑制劑具有更好的生存率和更少的脾 臟腫瘤浸潤（圖4）[4]。

       圖4. BGB-16673在異種移植模型中的作用

       在2023年ASH年會(huì )上，百濟神州首次公布BGB-16673正在進(jìn)行的人體試驗研究數據，已有128例患者入組，數據具有臨床意義，展現出可耐受安全性的特征和顯著(zhù)臨床緩解，有望解決BTK耐藥問(wèn)題。

       截至2023年5月26日，26個(gè)患者劑量水平接受不同劑量如50mg、100mg、200 mg、350mg和500mg治療，這些患者平均年齡為70.5歲（范圍為25-83歲），既往治療次數平均為3.5次（范圍為2-9次）。

       研究結果顯示：BGB-16673的暴露量以劑量依賴(lài)性方式增加。在劑量為每天≥50mg 的穩態(tài)下，BGB-16673暴露超過(guò)了給藥間隔內野生型和半胱氨酸481突變BTK的最大降解濃度。初步PD數據顯示，即使在最低劑量下，外周血和腫瘤組織中的BTK蛋白水平也會(huì )持續大幅降低。

       大多數CLL患者在治療的前3個(gè)周期中出現淋巴細胞增多。26例患者中有20例（77%）仍在接受治療（停藥：4例疾病進(jìn)展，2例退出）。

       在18例反應可評估的患者中，12例（67%）有應答（5/6 CLL、1/3 MCL、2/2 MZL、3/4 WM、1/2 FL、0/1 DLBCL；MCL為1 CR，其他均為PR；圖5），所有響應者都保持響應狀態(tài)，最長(cháng)的響應者在治療后停留60周[5]。

       圖5. BGB-16673的治療效果

       代表性藥物

       02

       HSK29116

       HSK29116是由海思科研發(fā)的一款口服的小分子BTK降解劑，可選擇性地阻斷BTK激酶活性、通過(guò)調節信號通路干預B細胞發(fā)育，從而控制各種B細胞惡性腫瘤的進(jìn)展。

       在臨床前研究中，HSK29116克服了由C481S BTK突變引起的耐藥性問(wèn)題。此外，HSK29116已證明抑制B細胞增殖，而不會(huì )造成其他BTK家族激酶活性的可測量損失。這種激酶選擇性可能會(huì )限制目前可用BTKis的一些脫靶毒性[6]。

       2023年的AACR會(huì )議上，HSK29116在復發(fā)或難治性B細胞惡性腫瘤患者中的I期研究試驗方案被報道，目前，HSK29116針對復發(fā)/難治性B細胞惡性腫瘤患者的國際多中心I期臨床試驗正在推進(jìn)中。

       這項首次人體、多中心、開(kāi)放標簽的I期研究（NCT04861779）于2021年開(kāi)始招募，以評估口服HSK29116的安全性、耐受性、藥代動(dòng)力學(xué)（PK）和藥效學(xué)特征。Ia期包括劑量遞增，以確定劑量限制性毒性，并確定Ib期劑量擴展的最大耐受劑量和/或推薦HSK29116劑量，于美國開(kāi)始。大約36名患者將入組Ia期，90名患者將入組Ib期（≥40名患者必須在之前接受過(guò)共價(jià)BTK抑制劑治療）。

       其主要終點(diǎn)是安全性，次要終點(diǎn)包括PK和研究者評估的總緩解率、緩解持續時(shí)間、緩解時(shí)間和無(wú)進(jìn)展生存期。探索性分析將評估HSK29116的抗腫瘤活性與BTK基因突變之間的關(guān)系，以及HSK29116的BTK蛋白降解作用。

       代表性藥物

       03

       NX-2127

       NX-2127是由Nurix Therapeutics研發(fā)的一款靶向BTK、Ikaros（IKZF1）和Aiolos（IKZF3）的PROTAC，通過(guò)連接鏈連接BTK抑制劑與CRBN配體而得，可以克服共價(jià)和非共價(jià)抑制劑引起的耐藥性問(wèn)題，降解突變的BTK蛋白（圖6）[1,7]。

       圖6. NX-2127的結構和作用機制

       2023年11月初，Nurix宣布FDA已暫停美國I期NX-2127-001研究的新研究參與者的篩選和招募。在部分擱置生效期間，Nurix將為在I期研究中繼續接受治療的患者提供目前的藥品，并將迅速與FDA合作，將改進(jìn)的NX-2127制造工藝和藥品引入Nurix的臨床開(kāi)發(fā)計劃[8]。

       2023年的ASH會(huì )議上，Nurix公布了NX-2127的臨床I期試驗積極數據：在復發(fā)或難治性（r/r）B細胞惡性腫瘤患者中，NX-2127治療可產(chǎn)生令人鼓舞的快速和持久反應，在17名可評估的非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者中，有2名完全緩解（CR），2例部分緩解（PR）。在27例可評估的慢性淋巴細胞白血?。–LL）患者中，11例經(jīng)歷了PR，客觀(guān)緩解率（ORR）為40.7%[9,10]。

       近期，Montoya等人在Science上報道了NX-2127的積極臨床結果：NX-2127對BTK實(shí)現了>80%的降解，且在接受治療的可評估CLL患者中觀(guān)察到79%的患者出現了臨床反應，與BTK突變類(lèi)型無(wú)關(guān)（圖7）[1]。

       圖7. NX-2127的臨床結果

       代表性藥物

       04

       NX-5948

       NX-5948是由Nurix Therapeutics研發(fā)的一款更強效的BTK降解劑，對野生型和突變型BTK蛋白都有降解活性，相比抑制劑有更強的細胞抑制活性（圖8）[11]。

       圖8. NX-5948的降解活性和細胞抑制活性

       NX-5948還有一個(gè)特點(diǎn)，它可以透過(guò)血腦屏障，通過(guò)口服給藥顯示劑量依賴(lài)性CNS暴露（圖9），并且能夠顯著(zhù)降低大腦中腫瘤細胞的BTK蛋白水平。

       圖9. NX-5948顯示劑量依賴(lài)性CNS暴露

       2023年的ASH會(huì )議上Nurix也公布了NX-5948的Ia/Ib期臨床試驗的劑量遞增階段的積極臨床數據。

       研究結果顯示：在接受50至200mg劑量的CLL人群中，截至2023年10月17日，7名患者中有6名表現出臨床益處，其中3名部分緩解（PR）均在進(jìn)行中，其中1名超過(guò)9個(gè)月，3名患者顯示疾病穩定（SD），2名患者正在接受治療。

       代表性藥物

       05

       HZ-Q1070

       HZ-Q1070是由和正醫藥研發(fā)團隊與上海藥物所李佳團隊基于DaTProD平臺共同開(kāi)發(fā)的一個(gè)結構新穎、降解強效、選擇性?xún)?yōu)異、成藥性良好的BTK降解劑。

       2023年AACR會(huì )議上，Liu等人報道了HZ-Q1070的臨床前數據。研究發(fā)現：

       1. HZ-Q1070降解催化突變的BTK（C481S/C481Y/C481F/T474M）蛋白，有效抑制BTK抑制劑耐藥腫瘤細胞系的生長(cháng)；

       2.選擇性好，不降解Aiolos和Ikaros等蛋白；

       3.在PK/PD實(shí)驗中，HZ-Q1070在體內表現出優(yōu)異的藥代動(dòng)力學(xué)特性和BTK降解活性；

       4. 低至3mg/kg的HZ-Q1070在TMD8和Mino異種移植小鼠模型中，顯示出顯著(zhù)的抑制作用[12]。

       03

       小結

       BTK的抑制劑已經(jīng)歷經(jīng)三代，但是容易引起耐藥性問(wèn)題，為了克服這個(gè)問(wèn)題，很多藥企在從事BTK的PROTAC研發(fā)，不過(guò)大部分都處于臨床早期，未來(lái)的發(fā)展如何還需要時(shí)間驗證。