在分析化學(xué)領(lǐng)域，液相色譜是應用最為廣泛的一種分離方法。其原理是將樣品溶液與固定于填充床上的流動(dòng)相進(jìn)行相對運動(dòng)，在移動(dòng)床中各組分的分配比由流動(dòng)相的種類(lèi)和流速決定，從而實(shí)現混合物中各種組分的高效分離。一般選擇液相色譜柱的原則是，分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱；對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱，以改善峰形，延長(cháng)色譜柱使用壽命等。

       01

       色譜方法的分類(lèi)

       液相色譜分離方法大致可以分為正相色譜、反相色譜、離子交換色譜、疏水作用色譜、體積排除色譜、親和色譜以及手性色譜。在高效液相色譜法中，目前應用得最廣泛的是正相色譜和反相色譜，其中反相色譜又是重中之中。

       02

       色譜分離基本原理

       正相色譜的分離原理

       根據溶質(zhì)極性的不同而產(chǎn)生的溶質(zhì)在吸附劑上吸附性強弱的差異而分離。

       反相色譜的分離原理

       根據因溶質(zhì)疏水性的不同而產(chǎn)生的溶質(zhì)在流動(dòng)相與固定相之間分配系數的差異而分離。

       范德姆特方程

       范德姆特方程（Van Deemter equation）在色譜學(xué)中是綜合考慮了分離過(guò)程中引起峰展寬的物理因素、動(dòng)力學(xué)因素和熱力學(xué)因素后得到的單位柱長(cháng)的總峰展寬與流動(dòng)相流速的關(guān)系式。

       03

       液相色譜柱的結構

       液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲（封頭）與柱填料等組成。

       柱管

       多用不銹鋼制成，如果使用時(shí)柱壓不高于70kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填?？罩鹘M件均為不銹鋼材質(zhì)，能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時(shí)要注意，柱及連接管內不能長(cháng)時(shí)間存留此類(lèi)溶劑，以避免腐蝕。

       壓帽

       即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽，中部有小孔，多為聚四氟乙烯制成，用于固定篩板。

       密封環(huán)

       位于接頭螺旋環(huán)內壁的彈性環(huán)，多為聚四氟乙烯制成，用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。

       04

       液相色譜柱規格

       色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類(lèi)

       1

       常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長(cháng)10~30cm

       2

       窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長(cháng)10~20cm

       3

       毛細管柱（又稱(chēng)微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm

       4

       半制備柱，內徑＞5mm

       5

       實(shí)驗室制備柱，內徑20~40mm，柱長(cháng)10~30cm

       6

       生產(chǎn)制備柱內徑可達幾十厘米

       05

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       諳薩（上海）實(shí)業(yè)有限公司

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       瑞斯泰康科技（北京）有限公司上海分公司

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       天津博蘊純化裝備材料科技有限公司

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       產(chǎn)品介紹：實(shí)驗室至工業(yè)級制備液相色譜柱及系統

       博蘊生物色譜柱采用DAC動(dòng)態(tài)軸向加壓技術(shù)，活塞升降快捷平穩，穩壓效果好，柱床內部始終保持恒定的動(dòng)態(tài)壓力，保證柱效；同時(shí)采用高壓彈簧蓄能密封圈和包覆PTFE的O型密封圈，保證活塞零泄漏；獨創(chuàng )液體分配系統，使柱效和對稱(chēng)性統一，分離效果更好；柱底端蓋與柱管連接采用C型卡箍，拆柱省力，方便，快捷；氣動(dòng)加壓控制，滿(mǎn)足特殊防爆操作環(huán)境要求。

       昭和電工科學(xué)儀器（上海）有限公司

       E7E23

       產(chǎn)品介紹：Shodex HILIC色譜柱 VN-50 1D

       · 填料鍵合二元醇基提高了填料表面的親水性，可以利用HILIC模式進(jìn)行分離

       · 適用于分析尺寸排阻模式和一般HILIC色譜柱分離不充分的寡核苷酸和寡糖的各聚體分離

       · VN-50 1D采用外部為SUS，內部[和液體接觸部分]為PEEK的二重結構柱管。彌補了PEEK柱管物理強度弱的缺點(diǎn)，可以在高壓條件下使用。

       · VN-50 1D內徑為1.0 mm，可以控制流速在0.1 mL/min以下，適用于高靈敏度分析。

       上海漢堯儀器設備有限公司

       N5A40

       產(chǎn)品介紹：YMC色譜柱

       YMC-Triart C18是一款具有卓越耐久性和優(yōu)秀峰形為特長(cháng)的色譜柱，適用pH條件寬泛且耐高溫條件。由于對鍵合相C18進(jìn)行了致密設定，因此在適度的疏水性和親水性間實(shí)現了優(yōu)化設計，不僅可作為各類(lèi)分析的優(yōu)選色譜柱，同時(shí)在100%水相條件下也能獲得良好的保留能力與再現性。

       蘇州麥可旺志生物技術(shù)有限公司

       E7F72

       產(chǎn)品介紹：COSMOSIL RNA系列高效液相色譜柱

       COSMOSIL RNA-RP1是一款特殊鍵合技術(shù)的反相HPLC色譜柱，對寡核苷酸有很高分辨率，與常規C18具有一樣的產(chǎn)品穩定性和選擇性，針對mRNA、ssRNA ladder、dsRNA ladder以及DNA ladder均有很好的分辨率和識別能力。

       隨著(zhù)實(shí)驗室建設的蓬勃發(fā)展，液相色譜柱在現代高效液相色譜分析中應用的越來(lái)越廣泛，色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間，并且使方法更具穩定性。如何將液相色譜柱的應用融入到實(shí)驗室建設中也成為了當下行業(yè)內備受矚目的熱點(diǎn)問(wèn)題。“世界制藥原料中國展”暨“世界制藥機械、包裝設備與材料中國展”（CPHI & PMEC China）在實(shí)驗室領(lǐng)域的延伸——實(shí)驗室儀器與裝備展區將通過(guò)展示各類(lèi)創(chuàng )新設備及應用方案，為行業(yè)呈現了前沿領(lǐng)域在實(shí)驗室建設過(guò)程中的應用及解決方案。

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