NTRK融合，廣泛分布在不同類(lèi)型的癌癥當中，如涎腺乳腺樣分泌癌和先天性纖維肉瘤，可檢測到100％NTRK融合，且2018/2019兩款NTRK抑制劑的獲批，業(yè)界更是對該方向藥物的產(chǎn)出寄予了厚望，甚至一度被認為是比肩于PD-1的小分子抗癌神藥。筆者通過(guò)查詢(xún)，全球大型制藥公司已有數十家對該領(lǐng)域跑馬圈地，并從化合物結構入手，總結如下。

       1、NTRK&TRKA-C簡(jiǎn)介

       NTRK，即神經(jīng)營(yíng)養因子受體酪氨酸激酶（NeuroTrophin Receptor Kinase），由高度同源性的激酶TRK-A、TRK-B、TRK-C組成，屬于NTRK基因編碼。

       1982年，即從在兩個(gè)結腸癌患者中發(fā)現了高分子量DNA，從而進(jìn)一步鑒定出激酶TRK-A；盡管TRK最初在腫瘤轉化中被確定，但是該家族普遍分布在神經(jīng)系統中，并且與神經(jīng)發(fā)育高度相關(guān)；而TRK系列也是由NTRK1、NTRK2和NTRK3編碼為T(mén)RK-A，TRK-B和TRK-C。

       2、已上市代表藥物

       1）首個(gè)上市藥物-拉羅替尼（larotrectinib）

       最初，Janne和Doebele等報道發(fā)現了larotrectinib，一種泛NTRK抑制劑，其IC50值在2-20 nM之間，對其他激酶具有良好的選擇性（IC50> 1 mM）。該品種美中不足的是，患者耐藥后療效持續時(shí)間大大降低。Larotrectinib于2018年獲FDA批準（商品名稱(chēng)：Vitrakvi），用于治療患有NTRK基因融合而非特定癌癥類(lèi)型的實(shí)體瘤的成年和小兒患者。

       2）第2個(gè)上市藥物-恩曲替尼（Entrectinib）

       恩曲替尼，可靶向TRKs、蛋白激酶ROS和激酶Alk，具有抑制多種癌癥適應癥的活性。對TRKA-C的IC50 <10 nM。研究發(fā)現恩曲替尼對3種不同類(lèi)型的癌細胞具有抑制活性：TRKA驅動(dòng)的細胞系（KM12，IC50-17 nM），Alk依賴(lài)性細胞系（SU-DHL-1，IC50-20 nM）和依賴(lài)Flt3的AML細胞系（MV-4-11 ，IC50-81 nM）。PS：與拉羅替尼結構對比，仍為3部分組成，但已存在顯著(zhù)的不同之處。

       3）LOXO-195（II期）-克服耐藥

       為克服拉羅替尼的耐藥問(wèn)題，Rothenberg和Hyman等人，報道發(fā)現了LOXO-195?；钚苑矫?，LOXO-195與拉羅替尼相似，但拉羅替尼對突變的TRKA的抑制作用大大降低，而LOXO-195對該突變的IC50仍可到2-9 nM；該品種目前處于II期階段。

       PS：將鏈狀結構修飾為大環(huán)，已是常用手段，國內外對此仍樂(lè )此不疲...

       3、跑馬圈地-數十家跨國公司圍獵NTRK

       當前TRK抑制劑的開(kāi)發(fā)方向可大致分為“ATP競爭性抑制劑”、“非ATP競爭性抑制劑”兩大類(lèi)，其中以“ATP競爭性抑制劑”為主，這也是大多數制藥公司的圍攻熱點(diǎn)。

       經(jīng)查詢(xún)，有近20家大型制藥公司對該領(lǐng)域進(jìn)行了專(zhuān)利布局跑馬圈地，篇幅原因，在此進(jìn)一步挑選出具有代表性的制藥公司（如阿斯利康、默沙東，及我國的正大天晴等）所布局的專(zhuān)利及代表化合物，以總覽TRK抑制劑的全球布局狀態(tài)。

       1）阿斯利康-專(zhuān)利群圍攻NTRK

       阿斯利康，自2005年以來(lái)已申請了如下圖所示的多個(gè)專(zhuān)利；并從中篩選出的N-嘧啶-1H-吡唑-3-胺結構，被最先定為T(mén)RK抑制劑的母核開(kāi)發(fā)方向。PS：至今，阿斯利康已有多個(gè)化合物進(jìn)入到臨床不同階段。

       后發(fā)現，將嘧啶替換為取代的苯環(huán)會(huì )降低其對TRKs的抑制作用，后繼續嘗試將嘧啶環(huán)替換為吡啶環(huán)，以及研究N在吡啶環(huán)中的位置，發(fā)現其活性趨勢如下圖所示。

       進(jìn)一步，在專(zhuān)利WO2007049041中，將5-氟哌啶進(jìn)一步引入上述結構中可大大增強對TRKs的抑制作用。此外，該化合物對JAK2的IC50值為3.9 nM。

       2）默沙東-同樣申請了眾多專(zhuān)利

       默沙東，專(zhuān)利WO2015042085保護了一系列對TRKA具有強抑制能力的聯(lián)芳基脲衍生物；其要求的保護的實(shí)施例化合物IC50近50nM。

       又一項專(zhuān)利中，保護了脲鏈接的芳基-芴結構，對TRKA的IC50值約為30 nM。

       另一項專(zhuān)利，刪除了脲結構中的氮原子，以酰胺的方式鏈接兩個(gè)芳環(huán)；該系列代表化合物對TRKA的抑制可達1 nM水平。

       再一項專(zhuān)利中，開(kāi)發(fā)了一個(gè)相似的核心骨架-吡唑并[4,3-b]吡啶，同樣，該系列化合物還顯示出高效的TRKA抑制能力。

       3）輝瑞-WO2015159175/WO2015170218

       輝瑞，專(zhuān)利保護了一類(lèi)稠環(huán)化合物，以N-苯基吡唑環(huán)作為核心骨架，3-位引入酰胺結構；該系列代表化合物的IC50值可以達到2 nM。

       另一專(zhuān)利WO2015170218，保護了一系列芳基取代的3-酰胺吡唑衍生物；同樣對TRKA存在較好的活性數據。

       4）百時(shí)美施貴寶- WO2007061882

       Bristol-Myers Squibb，專(zhuān)利保護了一系列吡咯并三嗪衍生物，該系列化合物對TRKA/B的IC50值最?。? nM。

       5）雷迪博士- US20150368238

       雷迪博士實(shí)驗室，專(zhuān)利保護了一系列咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物，該系列化合物對TRKA的抑制活性可達<50 nM。PS：結構與拉羅替尼很接近。

       6）正大天晴-WO2018022911

       中國正大天晴制藥集團有限公司，申請專(zhuān)利保護一系列吡唑并[1,5-a]嘧啶衍生物；在這一系列化合物中，LOXO-101中的脲基被酰胺基取代；且存在伯胺。該系列化合物具有泛TRK抑制能力，對TRKA-C的IC50值<10 nM，而JAK2不受影響；于國內而言，值得關(guān)注。

       7）TP therapeutics-WO2018077246

       TP therapeutics公司專(zhuān)利保護了一系列大環(huán)化合物，與LOXO-195相比，最大的不同是芳基和吡唑并[1,5-a]嘧啶二胺基之間的引入了一個(gè)氧原子；同時(shí)，該系列化合物顯示出對TRKA的高選擇性。

       8）Array Biopharma Inc-WO2015175788

       Array Biopharma Inc，專(zhuān)利保護了一系列芳基脲衍生物，這些衍生物對TRKA同樣具有良好的抑制能力及選擇性。PS：這類(lèi)化合物仍以3部分組成，脲結構被保留。

       9）鹽野義-WO2017135399

       鹽野義，專(zhuān)利保護了一系列的四氫吡咯取代的脲衍生物，該系列代表化合物也可達到<50 nM的IC50值。

       又一化合物專(zhuān)利，提出了一系列3環(huán)稠合脲衍生物；同樣該系列化合物對TRKA也存在較高的抑制活性。

       10）藍圖藥物-WO2017087778/US20160168156

       藍圖藥物，專(zhuān)利保護了一系列吡唑并[1,5-a]嘧啶衍生物，其實(shí)施例代表化合物除活性IC50值＜10nM，同時(shí)對G595R-KM12細胞系中的TRK具有較好的抑制作用。

       2017年，藍圖還申請了一系列吡唑并[3,4-d]嘧啶衍生物，代表化合物的IC50值＜10 nM。

       4、小結

       綜上結構不難發(fā)現，當前大多數制藥公司開(kāi)發(fā)的NTRK抑制劑主要由3部分構成，以拉羅替尼為參照的較多；同時(shí)，也有部分公司開(kāi)發(fā)的結構，成功完成了骨架躍遷。但，如此多的高活性化合物，真正進(jìn)入到臨床的并不多。筆者將在后續的文章中，繼續對該熱門(mén)方向藥物進(jìn)行梳理，會(huì )著(zhù)重研究那些未進(jìn)入臨床“失敗”的化合物，以了解是何種原因降低了他們的成藥性！

       參考資料：

       1. European Journal of Medicinal Chemistry.https://doi.org/10.1016/j.ejmech.2019.04.053

       2. Nature Reviews | Clinical Oncology.https://doi.org/10.1038/s41571-018-0113-0

       3. SCIFINDER

       4. www.drugfuture.com