熊果酸是存在于天然植物中的一種三萜類(lèi)化合物,具有鎮靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗潰瘍、降低血糖等多種生物學(xué)效應,熊果酸還具有明顯的抗氧化功能,因而被廣泛地用作醫藥和化妝品原料。而在最開(kāi)始的時(shí)候,人們是通過(guò)多次試驗才確定了熊果酸的含量,才開(kāi)始對功效做進(jìn)一步研究的。那么,熊果酸含量測定方法是怎樣的?
取熊果酸粉末1g,加甲醇20ml,超聲處理20分鐘,濾過(guò),濾液蒸干,殘渣加甲醇5ml使溶解,作為供試品溶液。另取枇杷葉對照藥材1g,同法制成對照藥材溶液。再取熊果酸對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液。
照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗,吸取上述三種溶液各1μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-丙酮(5:1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。
檢查:水分不得過(guò)5.0%(附錄IX H第一法);總灰分不得過(guò)5.0% (附錄IX K)。
含量測定:照高效液相色譜法(附錄Ⅵ D)測定。
色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-甲醇-0.5%乙酸銨溶液(67:12:21)為流動(dòng)相;檢測波長(cháng)為210nm。理論板數按熊果酸峰計算應不低于5000。
對照品溶液的制備:取齊墩果酸對照品適量,精密稱(chēng)定,加乙醇分別制成每1ml含熊果酸0.2mg的溶液,即得。
供試品溶液的制備:取熊果酸約10mg,精密稱(chēng)定,置具塞錐形瓶中,精密加入乙醇50ml,稱(chēng)定重量,超聲處理(功率250W 頻率50kHz)30分鐘,放冷,稱(chēng)定重量,加乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續濾液,即得。
測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10µl,注入液相色譜儀,測定,即得。
熊果酸按干燥品計算,含熊果酸(C30H48O3)的總量不得少于90%。
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