O-糖蛋?酶，質(zhì)譜級
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HLS IMPA001 O-糖蛋?酶 50μl
說(shuō)明：O-Glycoprotease是 Pseudomonas aeruginosa 分泌的免疫?屬蛋?酶(IMPa)，特異性切割 O-糖基化修飾的糖蛋?或糖肽中絲氨酸
(S)或蘇氨酸(T)肽鍵N-端。對于 O-1inked聚糖含唾液酸和不含唾液酸的粘蛋?S/T氨基酸沒(méi)有選擇性。?于 O-糖基化修飾蛋?表征和糖
蛋?O-糖苷結構的分析
物理形態(tài)：20mM Tris-HCl(pH7.8 at 25°C) ，100mM NaCl 溶液
分?量：97kDa
濃度：1ug/ul
儲存條件：-20°C冰箱冷凍
保質(zhì)期：-20°C冰箱保存24個(gè)?
pH 值范圍：O-糖蛋?酶在 pH7-8 活性最佳
酶切?法：
-適?酶切緩沖溶液:20mmol Tris or HEPES 緩沖液； pH 值在 7-8 范圍內
-去除表?活性劑的?變性或變性糖蛋?樣品，按照20:1蛋?和蛋?酶的量使?，酶切反應蛋?濃度控制在0.2-0.5ug/u1，37°C?浴孵育
2?時(shí)以上
-敏感性：O-糖蛋?酶對SDS，表?活性劑敏感;PH 緩沖液嚴格控制在 7-8 范圍內，否則酶活性降低
質(zhì)量控制 ｜Quality Control
純度：液相?譜280nm檢測雜質(zhì)蛋?質(zhì)峰強度，O-糖蛋?酶?譜峰強度?于 99.0%
專(zhuān)?性：??清胎球蛋?Fetuin，變性酶切，zic-hilic富集，ESI-MS/MS質(zhì)譜分析O-糖修飾的 S/T 專(zhuān)?性?于 95%
活性：50000unit/mg
單位定義：1ug/u1 O-糖蛋?酶稀釋 10倍，與5umol Fetuin糖蛋?反應的量，反應條件: 20ul 20mol Tris，pH=8.0，37°c?浴孵育2?時(shí)，
SDS-PAGE 電泳分析
LC-MS/MS 質(zhì)譜分析：20ug Fetuin 糖蛋? BT試劑變性，還原烷基化，UFD超濾脫鹽，加 100ul 20mmol Tris， 1ul O-糖蛋?酶孵育2?
時(shí)，通過(guò) zic-hilic Tip 柱富集， Q-E480 液質(zhì)分析，完整鑒定 S/T位點(diǎn)修飾和O-糖修飾組成。
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